En este vídeo vamos a explicar
cómo obtener
y madurar in vitro ovocitos
Gobiernos y porcinos los ovocitos,
se obtienen de varios provenientes
de matadero y estos ovarios
se transportan al laboratorio en
solución salina fisiológica.
38º, grados, una vez llegan
al laboratorio,
tendrán que ser primero lavados
en un detergente.
Este primer lavado se realiza para
eliminar cualquier resto
que pueda quedar del matadero y
tras esto se elaboran una vez
más en solución salida.
Ambos medios de lavado han sido
previamente atemperadas a 38º,
grados, la obtención de ovocitos
a partir de bares de matadero
en ambas especies se realiza
por aspiración ocular.
Para ello necesitamos agujas de 18
g y jeringas de 10 mililitros,
no todas las agujas de
18 ajenos valdrían,
necesitaríamos aquellas que
tengan un el corto
para evitar la pérdida de liquidez.
En cuanto a las jeringas,
podemos realizar 2 métodos
de aspiración,
1 consistirá en una aspiración
mecánica,
en la cual moveremos el embolado
con el pulgar;
el otro método de aspiración
es por vacío,
para ello realizaremos agujeros en
la oposición 2 la posición 8
colocaremos.
El embolado en la oposición.
8, para que el líquido entre
directamente por vacío.
Una vez lavados los ovarios,
es muy importante colocarlos
sobre una placa calefacta,
porque los ovocitos son muy
sensibles a la temperatura,
no solo los ovarios, se colocan
sobre la placa calefacta,
también hay que colocar los tubos
que vayamos a utilizar
y cualquier medio de uso.
Los Cobos, para la aspiración
en bovino
y en porcino, son diferentes.
Los todos en bovino
son todos con hijos y lo
reiteraremos hasta 2 con 5 mililitros con medio
de lavado.
Queda el caso del porcino.
Los 2 que vamos a utilizar,
son de punta redonda
y no se llegaran con ningún medio.
Los hogares de bovino y de porcino,
aunque tienen un tamaño similar,
tienen una forma bastante diferente.
Como podéis observar, el
número de títulos
en ambos ovarios es muy diferente.
Los ovarios de bovino tienen un
número de películas muy pequeño,
sin embargo los ovarios de porcino
están completamente llenos de folio
y bulos en toda su cuartel.
Vamos a empezar a esperando
los ovarios de bovino.
Para esto primero tenemos
que sacar el ovario
para que no se nos escuchan,
como hemos explicado
con anterioridad,
debido al menor número
de folio y bulos
que presenta el ovario de bovino,
es más recomendable utilizar el
método manual para ello,
colocaremos nuestra jeringa
en la palma de la mano
y utilizaremos el pulgar
para mover el vuelo.
Una cosa muy importante
a tener en cuenta
es que el visor de aguja
mire hacia abajo,
cuando esperamos los únicos con
vínculos que podemos aspirar
en una barrio de bovino, son
aquellos entre 2 8 milímetros.
Por ejemplo, este folio, creo de
aquí no la esperaríamos, sin embargo,
todos estos serían respirables.
Esto se debe a que queremos obtener
solo ovocitos, inmaduros.
Para empezar a aspirar a sujetar
-éramos firmemente el ovario
con nuestras manos
y entraríamos de forma lateral
ejerciendo Social.
Han descentrar y manteniendo
esas opción
hasta que hemos salido del baño.
Dividiríamos la pregunta de nuestra
aguja hacia nuestros dedos
siempre incidíamos entre ellos
para evitar pincharnos
si, como en este caso, tenemos
varios folios bulos seguidos
no hace falta que entremos, salgamos.
Podemos aspirar los todos de una vez.
Una forma para comprobar que
estamos aspirando bien
es escuchar el característico-
sonido de la expiración.
Una vez aspirado completamente el
ovario depositaria más el fluido
Fole ocular dentro de nuestro tuvo
es muy importante retirar la aguja
para evitar de colarnos, ovocitos
y también al soltar
el líquido tenemos que hacerlo
despacio tras esto continuaríamos
con el siguiente baremo en el caso
de los hogares de porcino,
debido al mayor número de Flix.
Bulos sería más recomendable
utilizar el método de vacío?
Como hemos mencionado, la hoja
tendría unos agujeros
en la posición 2, en la oposición 8,
el embole estaría fijo
en la oposición,
8 para aspirar vacío,
en este caso la sujeción de
las jeringas diferente,
y dirigiremos nuestra hoja
con el dedo índice.
El diésel como en el caso anterior,
tiene que estar mirando hacia abajo.
En los hogares de porcino
aspiramos los Fole,
pueblos entre 3 6 milímetros
y de igual manera
entraríamos por el lateral.
Podríamos esperar varias
Fole colosales.
Por no haber aspirado el ovario,
después daríamos el líquido
en el two.
Dejándolo caer simplemente
por gravedad.
Continuaríamos con el resto
de los hogares.
Una vez aspirado a los ovarios,
hemos dejado sedimentar el contenido
aspirado durante 10 o 15 minutos.
Ahora procederemos a retirar
o sobre en adelante.
En el caso de bovino retiraremos
el sobre en adelante,
hasta el codo.
Una vez esperado,
suspenderemos el contenido
completamente.
Y lo veremos en la placa de búsqueda.
Tras esto la baremos el tubo con
medio del lavado específico
de bovino.
Este lavado lo repetiremos varias
veces para asegurarnos
de que hemos cogido todos
los ovocitos.
Una vez lavado el tubo
moveremos la placa,
para homogeneizar el contenido.
En el caso de porcino
haremos todo eso.
Tras esto,
añadiremos directamente medio de
lavado específico de porcino.
Suspenderemos bien.
Y lo deposito haremos en
la placa de Huesca.
Realizaremos otro lado del tubo
para asegurarnos de coger
todos los ovocitos.
Y homogeneizaremos.
Las placas de búsqueda consisten
en placas de 90 milímetros
en las que hemos dibujado un agrade
ella para facilitar la búsqueda
de los negocios.
En ambas especies es muy importante
realizar la búsqueda de los ovocitos
sobre una placa calefacta,
porque son muy sensibles
a la temperatura.
Procederemos entonces a la selección
de los objetos de buena calidad
y a pasarnos a una placa de la nada.
Una vez seleccionados los
ovocitos nos pasaremos
a la placa de maduración en grupos
de entre 50 60 en un volumen
de 500 metros litros.
Trataremos de introducir el
menor medio posible.
La maduración de los
ovocitos bobinas.
Se realizarán en el innovador entre
22 24 horas a 38º grados
y medio de temperatura
y 5 por 100 de CO2.
Para mantener el pH del.
La especie porcina.
La maduración, se realiza durante
un tiempo entre 40 44 horas
y las condiciones de maduración.
Son 38º grados y medio
de temperatura,
5 por 100 de CO2 y condiciones de
hipoxia a 7 por 100 de oxígeno.